Для прояснения роли Runx2 в процессах остеогенной
дифференцировки клеток использовались три изоформы RUNX2: full- полноразмерный
ген дикого типа, delta – укороченная последовательность, stop – последовательность,
включающая стоп-кодон. С помощью метода лентивирусной трансдукции мы
активировали, либо подавляли экспрессию гена и продукцию белка в клетках.
Один из методов проверки биологического эффекта лентивирусных векторов был
ПЦР в реальном времени, показавший, что введение лентивирусных конструкций
повысило транскрипцию RUNX2 для всех трех изоформ в различных типах клеток.
Вестернблоттинг выявил увеличение синтетического потенциала клеток в
дифференцировке соответствующих изоформ белка Runx2 с добавочным эффектом
лентивирусных конструкций.

Активность промотора RUNX2 исследовали методом измерения интенсивности
люциферазы. Полученные данные свидетельствуют о активации промотора RUNX2, как
ответ при внесении конструкций. Добавление шпилечной конструкции на RUNX2
приводило к понижению активности его промотора.
Действие повышения экспрессии RUNX2 в остеобластах человека наблюдали
методами иммуноцитохимии и ПЦР в реальном времени. Анализ результатов говорит об
индуцирующем действии RUNX2 на экспрессию его канонической мишени –
остеокальцина, а экспрессия остеомаркер BMP2, наоборот, супрессируется. Данный
эффект сглаживается введение шпильки на RUNX2.