описание

Изучение генетических основ внутривидовой вариабельности у растений, животных и микроорганизмов, а также механизмов взаимодействий в симбиогенетических системах при помощи геномных, транскриптомных и протеомных подходов открывает перспективы для глубокого изучения точной регуляции хозяйственно-ценных признаков (содержание белка в семенах хозяйственно-ценных растений, эффективности продукции рекомбинантных белков у дрожжей) и молекулярных механизмов контроля надорганизменных симбиотических взаимодействий (на примерах «клубеньковые бактерии - бобовые растения» и «инфузории – эндосимбионты», в том числе родственные патогенам человека и домашних животных)

описание для неспециалистов

Для данного исследования характерны: широта проблем начиная с проблем структуры и функции отдельных генов, регуляции развития отдельного многоклеточного организма, до проблем видового разнообразия и межвидовых взаимодействий. Все исследования выполнены на базе комплекса уникальных биоресурсных коллекций СПбГУ с целью получения новых данных о внутривидовой изменчивости у растений, животных и микроорганизмов, а также молекулярных механизмах контроля надорганизменных взаимодействий с использованием классических, молекулярно-биологических и биоинформатических методов. Проанализирована вариабельность признаков, в том числе, хозяйственно-ценных в образцах биоресурсных коллекций СПбГУ.
Получены новые данные по локализации амилоидогенных белков растений и динамике формирования амилоидов. Получены штаммы дрожжей K. phaffii, продуцирующие амилоидогенные белки растений и изучены особенности их протеолиза. Показано влияние длины дня и баланса красного и дальнего красного света на формирование корнеплодов редиса. Обнаружено, что белок SBR задействован не только в транспорте мРНК, но и маркирует нервно-мышечные контакты у дрозофилы. Впервые изучена ультраструктура зооспор и спорангия у вновь описанной афелиды Protaphelidium rhizoclonii. Впервые обнаружен и исследован паразит морской зеленой водоросли, оказавшийся представителем свободноживущих амеб. Получены новые данные по разнообразию и распространению ряда видов амеб и описаны новые виды. Охарактеризована морфология нового вида эндосимбиотических бактерий инфузорий. На основе биоинформатических методов анализа метагеномных данных выявлены генетические детерминанты, ассоциированные с воспалительными заболеваниями кишечника человека. Завершена детальная характеристика комплекса биоресурсных коллекций СПбГУ, результаты которой обобщены в сводной обзорной статье. Полученные данные обладают новизной на мировом уровне и открывают перспективы дальнейшего изучения механизмов изменчивости у различных групп организмов и в надорганизменных системах «симбионт-хозяин».

основные результаты по этапу (подробно)

В ходе реализации этапа Проекта в 2025 году были проведены исследования,
направленные на получение новых данных о внутривидовой изменчивости у растений,
животных и микроорганизмов и о молекулярных механизмах, регулирующих
надорганизменные взаимодействия типа «симбионт – хозяин».



Для выполнения работ были задействованы следующие генетические и
культуральные ресурсы:



·        
генетические коллекции Санкт‑Петербургского
государственного университета (СПбГУ);



·        
коллекция водорослей и паразитов
водорослей СПбГУ;



·        
коллекция культур симбионтсодержащих
инфузорий СПбГУ;



·        
коллекция культур гетеротрофных
протистов кафедры зоологии беспозвоночных СПбГУ;



·        
коллекция гетеротрофных протистов
ресурсного центра «Культивирование микроорганизмов» Научного парка СПбГУ;



·        
ресурсы центра «Биобанк» Научного
парка СПбГУ.



 



По итогам проведённых исследований сформулированы следующие выводы:



-           Впервые в полностью
зрелом зерне ржи обнаружены структуры клеточных стенок, дающие в поляризованном
свете после окраски Конго красным яблочно-зелёное свечение, характерное для
амилоидов, аналогичные структуры ранее были выявлены и в зрелых семенах гороха.
Совокупность фактов свидетельствует о том, что данные структуры клеточных
стенок являются полисахаридами.



–       
Получены данные для разработки нового
микросателлитного маркера для селекционно-значимого гена доминантной
короткостебельности ржи Ddw1, для проверки его работы получена репродукция 27 инбредных
линий ржи, с 11 линиями получены гибриды, которые будут проанализированы в 2026
году.



–       
Впервые проведено комплексное исследование
изменения анатомии, распределения сахаров и профилей экспрессии генов при
светозависимой регуляции развития запасающего корня.



–       
В ходе разработки молекулярных SSR ДНК-маркеров
для характеристики линий генетической коллекции гороха проведено изучение
молекулярно-генетического полиморфизма с использованием четырех SSR-маркеров,
подтверждена гомозиготность линий из коллекции.



–       
Показано, что белок SBR (Dm NXF1) маркирует
нервно-мышечные контакты у личинок и взрослых мух дрозофилы. Локализация белка
SBR в районе клеточных мембран может отражать необходимость присутствия белка
SBR в зоне межклеточных контактов.



–       
- Разработан и использован программный пайплайн
PipeSeq, включающий автоматизированные этапы загрузки, выравнивания и
статистической обработки данных РНК-сек, а также позволяющий обсчитывать и
визуализировать данные, получаемые методами секвенирования РНК и ПЦР-РВ. Результаты
исследования показали, что методы секвенирования РНК и ОТ-ПЦР-РВ позволяют
выявить схожие паттерны изменения экспрессии генов, но демонстрируют различия
по оценке степени размера эффекта и чувствительности в детекции изменений. Полученные
данные позволяют предположить, что ФТ GATA C.
reinhardtii
образуют функционально специализированные группы,
координирующие адаптацию к световым условиям.



–       
- Проанализированы некоторые свойства штаммов
коллекции пекарских дрожжей Петергофских генетических линий, а также апробирована
методика получения мутантных дрожжей путем редактирования генома с помощью
системы CRISPR/Cas9.



–       
- Получена коллекция штаммов K. phaffii, содержащих
экспрессионные кассеты с кодирующей последовательностью растительных амилоидов.
Для части из них была проведена оценка эффективности синтеза белков и начата
работа по его оптимизации.



–       
- В результате исследований паразитических
организмов водорослей среди грибов и других протистов получены новые данные по
их строению и генетическим особенностям, которые кардинально меняют наши
представления об их разнообразии, биологическим особенностям и филогении.
Впервые и весьма детально изучена ультраструктура зооспор и спорангия у вновь
описанной афелиды Protaphelidium
rhizoclonii
. Впервые обнаружен и детально исследован паразит морской
зеленой водоросли, оказавшийся представителем нуклеариид - группы
свободноживущих амеб.



–       
- Описаны новые виды амеб отрядов Leptomyxida и Thecamoebida,
получены новые данные по тонкому строению, морфологии и молекулярной филогенетике
амеб это отряда. Полученный результат позволяет говорить о том, что видовое
разнообразие амебоидных протистов в окружающей среде серьезно недооценено. Эти
организмы могут играть более важную роль в круговороте веществ и энергии в
почвенных сообществах, нежели предполагалось ранее.



–       
- Охарактеризована морфология и ультраструктура
нового вида эндосимбиотических бактерий в клоне инфузорий P. bursaria, установлено, что криптические виды из комплекса видов P. aurelia демонстрируют различия в
паттерне гликозилирования белков, причем характер гликозилирования наиболее
схож у подверженных заражению микроспоридиями видов P. primaurelia и P.
pentaurelia
.



–       
- Создана коллекция из пяти штаммов-продуцентов
ocs/vis-like последовательностей природно-трансгенных растений для
фундаментальных исследований функциональной активности этих генов.



–       
- В рамках настоящего этапа исследований созданы
генетические конструкции для сверхпродукции белка Dps Salmonella enterica, отработан эффективный протокол продукции этого
белка, и проведена его наработка в препаративных количествах для проведения
детального анализа амилоидных свойств этого белка, который будет выполнен в
рамках этапа 2026 г.



–       
- Проведенное исследование показало
эффективность предложенного подхода к анализу метагеномных данных и подтвердило
возможность использования методов биннинга для повышения чувствительности
обнаружения кластеров биосинтетических генов, ответственных за синтез
бактерицидных веществ- Мы существенно расширили стандартную базу eQTL-маркеров
тканей человека Расширенный массив eQTL-маркеров позволил колокализовать
кандидатные варианты с eQTL-маркерами в пределах 13 локусов риска псориаза.
Колокализация с eQTL-маркерами позволила предсказать гены, с которыми связана
регуляторная роль каждого кандидатного варианта.



–       
- Завершены работы по детальной характеристике
комплекса биоресурсных коллекций СПбГУ. Установлено, что комплекс биоресурсных
коллекций СПбГУ представлен 40 биоресурсными коллекциями, состоящими как из
сохранившихся образцов, так и из живых организмов.



–       
Результаты исследований в рамках данного этапа
проекта опубликованы в целом ряде экспериментальных статей в международных
периодических изданиях, опубликована сводная обзорная статья о биоресурсных
коллекциях СПбГУ.



основные результаты по этапу (кратко)

С целью изучения внутривидовой изменчивости и генетических основ надорганизменных взаимодействий продолжено изучение уникальных биоресурсных коллекций растений, животных и микроорганизмов СПбГУ. Работы проведены с привлечением современных молекулярно-биологических, классических генетических и микробиологических методов. Получены новые данные по локализации и динамике фибриллогенеза амилоидогенных белков растений. Показано влияние длины дня и баланс красного и дальнего красного света на формирование корнеплодов редиса, выявлены гены-кандидаты на роль светозависимых регуляторов этого процесса. Охарактеризованы 16 линий гороха с использованием четырех SSR-маркеров. Обнаружено, что белок SBR маркирует нервно-мышечные контакты у личинок и имаго дрозофилы. Разработан автоматизированный алгоритм PipeSeq для изучения динамики экспрессии генов, у одноклеточной водоросли Ch. reinhardtii. Показано, что генетический фон линий дрожжей S. cerevisiae не снижает эффективность продукции целевых белков. Получены штаммы метилотрофных дрожжей K. phaffii, продуцирующие амилоидогенные белки растений и изучены особенности их протеолиза. Впервые изучена ультраструктура зооспор и спорангия у вновь описанной афелиды Protaphelidium rhizoclonii. Впервые обнаружен и исследован паразит морской зеленой водоросли, оказавшийся представителем свободноживущих амеб. Получены новые данные по разнообразию, генетической структуре и географическому распространению ряда видов амеб, описаны новые виды амеб. Охарактеризована морфология и ультраструктура нового вида эндосимбиотических бактерий в клоне инфузорий P. bursaria. Получены штаммы E. coli, продуцирующие последовательности ocs/vis-like природно-трансгенных растений. Проведен сравнительный анализ эффективности методов предсказания биосинтетических кластеров на основе метагеномных данных. Проведена сборка и аннтотация пангенома патобионта Megasphaera elsdenii и выявлены генетические детерминанты, ассоциированные с воспалительными заболеваниями кишечника человека. Завершена детальная характеристика комплекса биоресурсных коллекций СПбГУ, результаты которой обобщены в сводной обзорной статье. Результаты исследований опубликованы в целом ряде статей в международных периодических изданиях. Полученные данные обладают новизной на мировом уровне и открывают перспективы дальнейшего изучения механизмов изменчивости у различных групп организмов и в надорганизменных системах «симбионт-хозяин».

описание вклада в работу каждого из участников (учётная форма ЦИТиС)

Нижников Антон Александрович - введение, заключение, раздел 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12
Бузовкина Ирина Сергеевна - введение, заключение, раздел 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12
Карпов Сергей Алексеевич - введение, заключение, раздел 6
Антонец Кирилл Сергеевич - введение, заключение, раздел 11
Сабанеева Елена Валентиновна - введение, заключение, раздел 8
Смирнов Алексей Валерьевич - введение, заключение, раздел 7
Андреева Елена Александровна - введение, заключение, раздел 1
Голубкова Елена Валерьевна - введение, заключение, раздел 2
Чекунова Елена Михайловна - введение, заключение, раздел 3
Цветкова Наталья Владимировна - введение, заключение, раздел 1
Данилов Лаврентий Глебович – раздел 11
Додуева Ирина Евгеньевна - введение, заключение, раздел 1
Матвеенко Андрей Георгиевич - введение, заключение, раздел 4
Бурлаковский Михаил Сергеевич - раздел 1
Белоусов Михаил Владимирович - введение, заключение, раздел 10
Сурина Алла Васильевна – раздел 4
Барабанова Лариса Владимировна – раздел 2
Юнусбаев Баязит Булатович – раздел 11
Макеева Анастасия Станиславовна - введение, заключение, раздел 5
Виролайнен Павел Алексеевич - введение, заключение, раздел 3
Бондарук Дмитрий Денисович - раздел 2
Грудкова Дарья Максимовна раздел 2
Фаюд Хайдар - раздел 10
Константинов Захар Сергеевич - раздел 1
Шапошников Антон Дмитриевич - введение, заключение, раздел 9
Согомонян Каринэ Сергеевна - раздел 11
Шматов Федор Михайлович - раздел 11
Виниченко Вероника Борисовна - раздел 11
Даев Евгений Владиславович - раздел 12, заключение
Ларина Наталья Александровна - раздел 7, 8
Лебедева Наталья Аркадьевна - раздел 7, 8
Емельянова Мария Сергеевна - раздел 7, 8
Снарская Дина Данировна - раздел 7, 8
Царев Виктор Михайлович - раздел 7, 8

передача полной копии отчёта третьим лицам для некоммерческого использования: разрешается/не разрешается (учётная форма ЦИТиС)

не разрешается

проверка отчёта на неправомерные заимствования во внешних источниках: разрешается/не разрешается (учётная форма ЦИТиС)

не разрешается
Краткое названиеGZ-2025
АкронимGZ_F_2024-2
СтатусВыполняется
Эффективные даты начала/конца1/01/2531/12/25

    Области исследований

  • БИОРЕСУРСНЫЕ КОЛЛЕКЦИИ, Биоинформатика, геном, пангеном, рекомбинантные белки, симбиоз, амилоиды

Документы

ID: 129364155