Методика быстрой сканирующей циклической вольтамметрии (БСЦВ) имеет широкий круг применения в научной практике. В нашей лаборатории БСЦВ применяется для исследования дофаминергической (ДА) нейропередачи у крыс и мышей. Данный метод позволяет в режиме реального времени и с высоким временным (400 В\с) и пространственным разрешением (d микроэлектрода = 6 µ) производить мгновенный анализ действия фармакологических веществ, влияющих на ДА нейропередачу в зоне прилежащего ядра (NAc).
Перед процедурой БСЦВ in vivo, грызунам производят анестезию с помощью уретана 1,5 г\кг, далее, после проведения стереотаксической операции, электроды (регистрирующий и стимулирующий) опускают по стереотаксическим координатам на соответствующие глубины. Для регистрации мезолимбического дофаминового (ДА) сигнала в зоне NAc, используется потенциал треугольной формы (-0,4 В до +1,3 В) по сравнению с постоянным потенциалом электрода сравнения (Ag/AgCl). После электрической стимуляции (6-60 Гц, 330 µА) зоны VTA, аппаратно регистрируется мгновенный ДА ответ в зоне NAc. После установки стабильного ДА сигнала в зоне NAc применяют различные экспериментальные протоколы.
В результате, с помощью метода БСЦВ in vivo нами было показано, что у животных DAT KO, по сравнению с животными DAT WT значительно (в 10 раз) уменьшена скорость обратного захвата ДА, практически без изменения параметров выброса, так же, после введения раклоприда у крыс в 3 раза, у мышей в 1.5 – 2 раза увеличиваются параметры выброса ДА. У мышей под воздействием GBR, введенным через 30 мин после введения Д2 антагониста раклоприда, увеличивается в 4 раза выброс и в 3 раза снижается обратный захват ДА через 60 минут после введения. Через 24 часа после воздействия стресса социального поражения крысы (самцы и самки) демонстрируют признаки депрессивно-подобного поведения, вместе со значительным (P≤0.0001) увеличением ДА ответа и снижением эффективности Д2 ауторецепторной регуляции по сравнению с животными контрольной группы, у самок крыс показаны индивидуальные различия в действии однократного стресса социального поражения на ДА нейропередачу.
Таким образом, можно заключить, что БСЦВ in vivo – эффективный метод, который позволяет в режиме реального времени исследовать различные параметры (выброс, обратный захват, синтез и т. д.) дофаминергической (ДА) нейропередачи у животных, так же производить оценку действия фармакологических агентов на мезолимбическую ДА систему, что может быть полезно в современных научных исследованиях.
Заключение биоэтической комиссии СПБГУ № 131-03-8 от 25.09.2023. Исследования проведены с использованием оборудования РЦ РМиКТ СПбГУ и РЦ «Виварий» СПбГУ. Работа выполнена при поддержке СПБГУ ID: 129659216.
