TY - CONF

T1 - Изучение механизмов токсичности кардиотонического стероида уабаина для недифференцированной и дифференцированной культуры нейробластомы SH-SY5Y

AU - Казанская, Рогнеда Борисовна

AU - Маркина, Алиса Александровна

AU - Завьялов, Владислав Андреевич

N1 - Conference code: XXVIII

PY - 2021

Y1 - 2021

N2 - дение: Известно, что кардиотонические стероиды (КТС), являющиеся специфическими ингибиторами Na,K-АТФазы [4] могут блокировать рост ряда опухолевых культур [3]. В частности, было показано, что 1 мкМ уабаин вызывает гибель культуры нейробластомы SH-SY5Y. При этом в культуре происходит активация киназ Akt и ERK1/2,а также изменение количества белков семейства Bcl-2 в сторону преобладания проапоптотических [2]. В то же время на культуре нейробластомы SK-N-SH было показано, что 1мкМ уабаин вызывает значительно большее снижение жизнеспособности недифференцированной культуры, чем дифференцированной при помощи ретиноевой кислоты (РК) внейроно-подобную культуру [1]. На основании представленных данных литературы былосделано предположение о том, что минимальные токсичные концентрации для дифференцированной и недифференцированной нейробластомы могут различаться.Методы: В качестве модели для исследования была использована культура нейробластомы человека SH-SY5Y. Недифференцированную нейробластому культивировали всреде DMEM/F12 с добавлением 10% эмбриональной сыворотки телят. Дифференцированную нейробластому культивировали в среде DMEM/F12 с добавлением 1% эмбриональной телячьей сыворотки, 1 мкМ РК, и 1% форбол-12-миристат-13-ацетата. При проведении экспериментов культуры инкубировали с различными концентрациями уабаина,а также ингибиторами: протеинкиназы C (PKC), хелеритрином, MEK1/2, PD0325901, иPI3K, LY294002. Жизнеспособность культуры оценивали через 24 ч при помощи МТТтеста.Результаты: В данном исследовании было показано, что уабаин вызывает уменьшениежизнеспособности недифференцированной культуры SH-SY5Y в концентрации 10 нМ. Вто же время, жизнеспособность дифференцированной РК нейробластомы снижалась лишьпри воздействии 100 нМ уабаина. Также был проведен анализ того, активация каких сигнальных каскадов опосредует токсичность уабаина. Было показано, что хелеритрин значительно уменьшал токсический эффект 10 нМ и 100 нМ уабаина на недифференцированную культуру SH-SY5Y. В то же время, 1 мкМ PD0325901 и LY не влияли на токсическийэффект уабаина.Заключение: В данном исследовании было показано, что концентрации уабаина, которые необходимы для уменьшения жизнеспособности недифференцированной культурынейробластомы человека на порядок ниже, чем для дифференцированной в непролиферирующую нейрональную культуру. Также было показано, что токсический эффект уабаинана недифференцированную нейробластому опосредован активацией PKC. Таким образом,данное исследование открывает перспективу для дальнейшего исследования КТС как противоопухолевых препаратов, поскольку их токсичность для дифференцированных клетокможет быть на порядок меньше, чем для активно пролиферирующих опухолевых.

AB - дение: Известно, что кардиотонические стероиды (КТС), являющиеся специфическими ингибиторами Na,K-АТФазы [4] могут блокировать рост ряда опухолевых культур [3]. В частности, было показано, что 1 мкМ уабаин вызывает гибель культуры нейробластомы SH-SY5Y. При этом в культуре происходит активация киназ Akt и ERK1/2,а также изменение количества белков семейства Bcl-2 в сторону преобладания проапоптотических [2]. В то же время на культуре нейробластомы SK-N-SH было показано, что 1мкМ уабаин вызывает значительно большее снижение жизнеспособности недифференцированной культуры, чем дифференцированной при помощи ретиноевой кислоты (РК) внейроно-подобную культуру [1]. На основании представленных данных литературы былосделано предположение о том, что минимальные токсичные концентрации для дифференцированной и недифференцированной нейробластомы могут различаться.Методы: В качестве модели для исследования была использована культура нейробластомы человека SH-SY5Y. Недифференцированную нейробластому культивировали всреде DMEM/F12 с добавлением 10% эмбриональной сыворотки телят. Дифференцированную нейробластому культивировали в среде DMEM/F12 с добавлением 1% эмбриональной телячьей сыворотки, 1 мкМ РК, и 1% форбол-12-миристат-13-ацетата. При проведении экспериментов культуры инкубировали с различными концентрациями уабаина,а также ингибиторами: протеинкиназы C (PKC), хелеритрином, MEK1/2, PD0325901, иPI3K, LY294002. Жизнеспособность культуры оценивали через 24 ч при помощи МТТтеста.Результаты: В данном исследовании было показано, что уабаин вызывает уменьшениежизнеспособности недифференцированной культуры SH-SY5Y в концентрации 10 нМ. Вто же время, жизнеспособность дифференцированной РК нейробластомы снижалась лишьпри воздействии 100 нМ уабаина. Также был проведен анализ того, активация каких сигнальных каскадов опосредует токсичность уабаина. Было показано, что хелеритрин значительно уменьшал токсический эффект 10 нМ и 100 нМ уабаина на недифференцированную культуру SH-SY5Y. В то же время, 1 мкМ PD0325901 и LY не влияли на токсическийэффект уабаина.Заключение: В данном исследовании было показано, что концентрации уабаина, которые необходимы для уменьшения жизнеспособности недифференцированной культурынейробластомы человека на порядок ниже, чем для дифференцированной в непролиферирующую нейрональную культуру. Также было показано, что токсический эффект уабаинана недифференцированную нейробластому опосредован активацией PKC. Таким образом,данное исследование открывает перспективу для дальнейшего исследования КТС как противоопухолевых препаратов, поскольку их токсичность для дифференцированных клетокможет быть на порядок меньше, чем для активно пролиферирующих опухолевых.

M3 - тезисы

SP - 1

EP - 2

T2 - XXVIII Международная конференция студентов, аспирантов и молодых учёных "Ломоносов-2021"

Y2 - 12 April 2021 through 23 April 2021

ER -