дение: Известно, что кардиотонические стероиды (КТС), являющиеся специфическими ингибиторами Na,K-АТФазы [4] могут блокировать рост ряда опухолевых культур [3]. В частности, было показано, что 1 мкМ уабаин вызывает гибель культуры нейробластомы SH-SY5Y. При этом в культуре происходит активация киназ Akt и ERK1/2,
а также изменение количества белков семейства Bcl-2 в сторону преобладания проапоптотических [2]. В то же время на культуре нейробластомы SK-N-SH было показано, что 1
мкМ уабаин вызывает значительно большее снижение жизнеспособности недифференцированной культуры, чем дифференцированной при помощи ретиноевой кислоты (РК) в
нейроно-подобную культуру [1]. На основании представленных данных литературы было
сделано предположение о том, что минимальные токсичные концентрации для дифференцированной и недифференцированной нейробластомы могут различаться.
Методы: В качестве модели для исследования была использована культура нейробластомы человека SH-SY5Y. Недифференцированную нейробластому культивировали в
среде DMEM/F12 с добавлением 10% эмбриональной сыворотки телят. Дифференцированную нейробластому культивировали в среде DMEM/F12 с добавлением 1% эмбриональной телячьей сыворотки, 1 мкМ РК, и 1% форбол-12-миристат-13-ацетата. При проведении экспериментов культуры инкубировали с различными концентрациями уабаина,
а также ингибиторами: протеинкиназы C (PKC), хелеритрином, MEK1/2, PD0325901, и
PI3K, LY294002. Жизнеспособность культуры оценивали через 24 ч при помощи МТТтеста.
Результаты: В данном исследовании было показано, что уабаин вызывает уменьшение
жизнеспособности недифференцированной культуры SH-SY5Y в концентрации 10 нМ. В
то же время, жизнеспособность дифференцированной РК нейробластомы снижалась лишь
при воздействии 100 нМ уабаина. Также был проведен анализ того, активация каких сигнальных каскадов опосредует токсичность уабаина. Было показано, что хелеритрин значительно уменьшал токсический эффект 10 нМ и 100 нМ уабаина на недифференцированную культуру SH-SY5Y. В то же время, 1 мкМ PD0325901 и LY не влияли на токсический
эффект уабаина.
Заключение: В данном исследовании было показано, что концентрации уабаина, которые необходимы для уменьшения жизнеспособности недифференцированной культуры
нейробластомы человека на порядок ниже, чем для дифференцированной в непролиферирующую нейрональную культуру. Также было показано, что токсический эффект уабаина
на недифференцированную нейробластому опосредован активацией PKC. Таким образом,
данное исследование открывает перспективу для дальнейшего исследования КТС как противоопухолевых препаратов, поскольку их токсичность для дифференцированных клеток
может быть на порядок меньше, чем для активно пролиферирующих опухолевых.