Введение. Известно, что в эритроцитах человека отсутствует ядро и рибосомы. Однако показано, что в этих клетках содержится некоторое количество мРНК. При этом эритроциты продуцируют значительную часть внеклеточных везикул, обнаруживаемых в плазме крови. Внеклеточные везикулы, в том числе эритроцитарного происхождения, выступают переносчиками большого количества сигнальных молекул, представленных в основном некодирующими РНК. Однако, уровни мРНК, кодирующих белки, в эритроцитарных везикулах слабо изучено. Также не ясно насколько меньше мРНК в везикуле по сравнению с выделяющей её клеткой. По этой причине целью настоящей работы было определить есть ли в везикулах эритроцитарного происхождения мРНК α- и β-цепей гемоглобина (HBA и HBB) и сравнить относительные концентрации этих кодирующих РНК в эритроцитах и их везикулах. Материалы и методы. Кровь, полученная от шести доноров (1 женщина и 5 мужчин 25–50 лет), разделялась на клетки и обедненную тромбоцитами плазму. Клетки и везикулы в плазме были окрашены антителами против белка CD235 (главный антиген мембраны эритроцита). На приборе MoFlo Astrios EQ было отсортировано по 3000 событий (везикул или клеток) в каждой пробе. Из проб выделялась РНК, ревертировалась с случайными праймерами и проводилась полимеразная цепная реакция в реальном времени с праймерами специфичными к генам HBA и HBB.
Относительная концентрация РНК определялась по формуле 2(Ct(негативного контроля) — Ct(рабочей пробы)).Результаты. Оказалось что относительные уровни HBB и HBA имеют достоверные отличия между фракциями эритроцитов и везикул (p = 0,0043 в обоих случаях). Концентрация мРНК HBB в эритроцитах в 45,3 раза больше, чем в везикулах, а HBA в 115 раз больше, чем в везикулах. Следует отметить, что ранее в нашей группе было показано, что уровень некодирующих РНК (микроРНК, пиРНК и Y -РНК) практически равны в эритроцитах и эритроцитарных везикулах. Заключение. Таким образом, оказывается, что эритроциты производят селекцию РНК, упаковывая в везикулы много некодирующих РНК и намного меньше РНК кодирующих белки. Возможно, что мРНК просто пассивно попадают в везикулы в низкой концентрации, а некодирующие РНК специально плотно упаковываются в них. Вероятно это происходит потому, что некодирующие РНК выполняют сигнальную функцию.
Работа выполнена при финансовой поддержке РНФ (№ 25–25–00057)
