В рамках работы предложен способ определения двух антибиотиков, часто используемых для лечения заболеваний человека – офлоксацина и моксифлоксацина – в биологической жидкости. Разработанный способ извлечения фторхинолонов включает добавление к разбавленной пробе ди-(2-этилгексил)-фосфорной кислоты и раствора аммиака для in situ образования амфифила. При введении раствора хлорида натрия наблюдалась коацервация и разделение фаз с извлечением аналитов в обогащенную амфифилами фазу. В ходе работы были оптимизированы основные параметры экстракционной системы с целью достижения наибольших коэффициентов концентрирования для повышения чувствительности анализа, а также для миниатюризации стадии пробоподготовки. Предложенный способ извлечения фторхинолонов для их последующего определения методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуориметрическим детектированием апробирован на реальных образцах мочи с добавками аналитов, а также оценены его аналитические характеристики. Наконец, проведены измерения физико-химических характеристик полученного су-прамолекулярного растворителя и построена фазовая диаграмма системы.