TY - CONF

T1 - Выявление участков белка PrP, отвечающих за связывание его агрегированной формы с амилоидным пептидом бета

AU - Антонец, Кирилл Сергеевич

AU - Галкин, Алексей Петрович

AU - Рубель, Александр Анатольевич

N1 - Антонец К.С., Галкин А.П., Рубель А.А. Выявление участков белка PrP, отвечающих за связывание его агрегированной формы с амилоидным пептидом бета / Сборник тезисов 16-й Международной Пущинской школы-конференции молодых ученых "БИОЛОГИЯ – НАУКА ХХI ВЕКА". 16-21 апреля, 2012. Пущино. С. 90-91. ISBN 978-5-600-00016-2.

PY - 2012/4/16

Y1 - 2012/4/16

N2 - В связи с увеличением продолжительности жизни, большое значение приобретает исследование нейродегенеративных заболеваний. В основе многих болезней, связанных с нейродегенерацией, лежит изменение конформации белков, продуцируемых в центральной нервной системе, что приводит к их агрегации. В случае болезни Альцгеймера агрегирует пептид амилоид-бета, продукт протеолиза белка APP, а в случае прионных заболеваний, являющихся инфекционными, - белок PrP. В последние годы показано, что агрегаты PrP способны связывать мономерный Aβ и индуцировать его агрегацию. Таким образом, взаимодействие PrP и Aβ может играть существенную роль в развитии болезни Альцгеймера. Тем не менее, до настоящего времени не известно, какие участки агрегированного PrP связывают Аβ.Для выявления таких участков в работе была исследована с помощью FRET способность прионного белка с делециями различных участков взаимодействовать с амилоидом-бета. Метод FRET основан на передаче энергии между флуоресцирующими белками при их сильном сближении, поэтому Аβ и разные варианты PrP(полноразмерный и без первых 69 и 87 аминокислот: PrP(23-231), PrP(90-231) и PrP(110-231)) были слиты с флуоресцирующими белками YFP и CFP. Полученные химерные белки продуцировались в дрожжах Saccharomyces cerevisiae. Удалось показать, что показатели эффективности FRET и частота колокализации PrP и Аβ для обоих укороченных вариантов были снижены по сравнению с полноразмерным PrP. Однако, для PrP(90-231) снижение частоты колокализации и эффективности FRET было примерно в два раза, в то время как для PrP(110-231) показатели были существенно меньше, чем для PrP(90-231). Такая разница между показателями обусловлена отсутствием у PrP(110-231) последовательности с 90 по 110, что говорит о вкладе этого участка во взаимодействие между PrP и Aβ.

AB - В связи с увеличением продолжительности жизни, большое значение приобретает исследование нейродегенеративных заболеваний. В основе многих болезней, связанных с нейродегенерацией, лежит изменение конформации белков, продуцируемых в центральной нервной системе, что приводит к их агрегации. В случае болезни Альцгеймера агрегирует пептид амилоид-бета, продукт протеолиза белка APP, а в случае прионных заболеваний, являющихся инфекционными, - белок PrP. В последние годы показано, что агрегаты PrP способны связывать мономерный Aβ и индуцировать его агрегацию. Таким образом, взаимодействие PrP и Aβ может играть существенную роль в развитии болезни Альцгеймера. Тем не менее, до настоящего времени не известно, какие участки агрегированного PrP связывают Аβ.Для выявления таких участков в работе была исследована с помощью FRET способность прионного белка с делециями различных участков взаимодействовать с амилоидом-бета. Метод FRET основан на передаче энергии между флуоресцирующими белками при их сильном сближении, поэтому Аβ и разные варианты PrP(полноразмерный и без первых 69 и 87 аминокислот: PrP(23-231), PrP(90-231) и PrP(110-231)) были слиты с флуоресцирующими белками YFP и CFP. Полученные химерные белки продуцировались в дрожжах Saccharomyces cerevisiae. Удалось показать, что показатели эффективности FRET и частота колокализации PrP и Аβ для обоих укороченных вариантов были снижены по сравнению с полноразмерным PrP. Однако, для PrP(90-231) снижение частоты колокализации и эффективности FRET было примерно в два раза, в то время как для PrP(110-231) показатели были существенно меньше, чем для PrP(90-231). Такая разница между показателями обусловлена отсутствием у PrP(110-231) последовательности с 90 по 110, что говорит о вкладе этого участка во взаимодействие между PrP и Aβ.

KW - PrP

KW - FRET

KW - дрожжевая модель

M3 - тезисы

SP - 90

EP - 91

T2 - 16-я Международная Пущинская школа-конференция молодых ученых "БИОЛОГИЯ - НАУКА XXI ВЕКА"

Y2 - 16 April 2012 through 21 April 2012

ER -