Цель. Задачей настоящей работы было получение селективной системы на основе вируса М1 дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Методы. Для создания штамма-реципиента фрагмент ДНК, кодирующий киллер-токсин вируса М1 под контролем регулируемого промотора гена GAL1, был встроен в геном штаммов Y-1236 и Y-2177 S. cerevisiae, чувствительных к токсинам. Результаты. Интеграция такой экспрессионной кассеты приводит к появлению условной летальности, а именно, данные штаммы гибнут на среде с галактозой, когда происходит синтез киллер-токсина. Для трансформации полученных штаммов используется линейный фрагмент ДНК, содержащий ген интереса, фланкированный последовательностями, гомологичными промотору гена GAL1 и терминаторной области гена CYC1. При трансформации за счет гомологичной рекомбинации происходит выщепление последовательности, кодирующей киллер-токсин, и трансформанты растут на среде с галактозой. Выводы. Предложенная селективная система сочетает в себе основные преимущества других систем: возможность применения прост
Язык оригиналарусский
Страницы (с-по)251-263
ЖурналЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ГЕНЕТИКА
Том18
Номер выпуска2
СостояниеОпубликовано - 2020
Опубликовано для внешнего пользованияДа

    Области исследований

  • killer-toxins, M1 and M28 viruses, selective markers, yeast Saccharomyces cerevisiae, вирусы М1 и М28, дрожжи Saccharomyces cerevisiae, киллер-токсины, селективные маркеры

ID: 78600530