Цель. Изучение функциональных свойств катионных антимикробных пептидов 0-дефенсинов, выделенных из лейкоцитов крови гамадрила Papio hamadryas. Материалы и методы. 0-Дефенсины гамадрила были выделены из экстрактов лейкоцитарной массы методами ультрафильтрации, препаративного электрофореза и обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. В качестве тестовых микроорганизмов использовали грамотрицательные бактерии Escherichia coli, грамположительные бактерии Listeria monocytogenes и Staphylococcus aureus, грибы Candida albicans. Минимальные ингибирующие концентрации (МИК) определяли, тестируя последовательные разведения исследуемых пептидов методом радиальной диффузии в агарозном геле. Микробоцидное действие оценивали методом подсчета выживших КОЕ после инкубации с пептидами. Влияние 0-дефенсинов на проницаемость мембран E.coli оценивали с помощью хромогенных маркеров о-нирофенил- β-D-галактопиранозида и нитроцефина. Результаты. Сравнительный анализ антимикробных свойств 0-дефенсинов гамадрила показал, что они обнаруживают широкий спектр антимикробного действия, сопоставимый с 0-дефенсином макаки резус RTD-1 и проявляют бактерицидный и фунгицидный эффекты в микромолярных концентрациях. Изучено влияние различных условий среды (низкая и повышенная ионная сила, содержание в среде сыворотки крови) на антимикробную активность 0-дефенсинов. Показано, что 0-дефенсины обладают способностью увеличивать проницаемость наружной мембраны E.coli, однако в отличие от 0-дефенсинов не оказывают заметного влияния на проницаемость внутренней мембраны. Заключение. Выделенные из лейкоцитов крови гамадрила 0-дефенсины являются эффективными антимикробными агентами с широким спектром микробоцидного действия. 0-Дефенсины гамадрила в отличие от 0-дефенсинов сохраняют антимикробную активность в средах с повышенной ионной силой. 0-Дефенсины увеличивают проницаемость наружной, но не цитоплазматической мембраны E.coli, что позволяет предположить механизм антимикробного воздействия этих пептидов, отличный от 0-дефенсинов.
Ключевые слова