В работе исследованы возможности ионных жидкостей на основе имидазола в качестве модификаторов подвижной и неподвижной фаз в условиях обращенно-фазовой и гидрофильной хроматографии (HILIC) для разделения полярных биологически активных веществ (аминокислоты, витамины и лекарственные препараты). Показано, что введение ионных жидкостей (ИЖ) на основе имидазола в состав элюента приводит к динамической модификации поверхности сорбента С18, в результате увеличивается эффективность и селективность при разделении основных аналитов. Благодаря образованию гидрофильного покрытия обеспечивается возможность реализации режима HILIC. Изучены факторы, влияющие на разделение аналитов: длина алкильного радикала (C4, C6, C8, C12), природа противоиона (Cl-, BF4-), концентрация ИЖ (0.1-20 мМ), рН элюента, концентрация буферного раствора и органической добавки. Показано, что с использованием традиционного катионного модификатора цетилтриметиламмония бромида (ЦТАБ) с концентрацией ниже критической концентрации мицеллообразования (ККМ) условия HILIC не реализуются. Установлены пределы обнаружения в HILIC (0,01-1 мкг/мл), что достаточно для определения лекарственных препаратов в реальных объектах (сыворотка крови, моча). В выбранных условиях HILIC с участием ионной жидкости C6MImCl проведен анализ образцов плазмы крови в присутствии препаратов: п- аминосалициловой кислоты, левофлоксацина, спарфлоксацина.