В работе выявлены перспективы применения гидрофильных ионных жидкостей (ИЖ) на основе имидазола (C12MImCl, C16MImCl) в качестве модификаторов и поверхностно-активных веществ (ПАВ), а также гидрофобных ИЖ (C6MImBF4) как «масла» в составе микроэмульсии при разделении стероидных гормонов методом микроэмульсионной электрокинетической хроматографии (МЭЭКХ). Определены факторы (концентрация ионной жидкости, природа и значение рН фонового электролита, соотношение различных компонентов микроэмульсии), влияющие на эффективность и селективность разделения аналитов. Найдены подходящие условия для полного разделения модельной смеси стероидных гормонов: кортизола, кортизона, 11-дезоксикортизола, 11-дезоксикортикостерона, 11-дегидрокортикостерона. Проведено сопоставление аналитических характеристик методов мицеллярной и микроэмульсионной электрокинетической хроматографии при определении стероидов. Обнаружено, что добавка 15 мМ 2-гидроксипропил-β-циклодекстрина привела к увеличению селективности разделения, и при этом время анализа уменьшилось. Применение методов on-line концентрирования позволило снизить пределы обнаружения аналитов до 50 нг/мл. На основании полученных результатов предложен экспрессный способ определения стероидных гормонов в образцах мочи и сыворотки крови методом МЭЭКХ с введением имидазолиевой ионной жидкости в состав фонового электролита.