Растения группы Iris широко используются в традиционной медицине для борьбы с бактериальными и вирусными инфекциями, а также как антиспазмотическое, гемостатическое или слабительное средство. Известно, что растения этого рода богаты вторичными метаболитами. Выделенные из ирисов вещества имеют противобактериальную, противовирусную, противораковую, противовоспалительную, антиоксидантную и цитотоксическую активность. Они относятся к классам флавоноидов, изофлавоноидов, тритерпеноидов, иронов, фенолов, хинонов, ксантонов и их гликозидов. Перспективным направлением получения лекарственных растений является применение биотехнологических подходов, позволяющих получать лекарственное сырьё высокого качества, а также регулировать его фитохимический состав. Растительная биомасса Iris sibirica L., полученная методами биотехнологии, является ценным и малоизученным лекарственным сырьём с антимикробной активностью. В связи с этим требуется всестороннее изучение данного растительного сырья для получения как можно большего числа индивидуальных характеристик и создания методик, позволяющих получать характеристические хроматографические профили растения. Это позволит оптимизировать и контролировать качество производимого сырья по различным показателям.
Целью данной работы является получение и исследование хроматографических профилей флавоноидов и аминокислот биотехнологического сырья Iris sibirica L., а также выявление закономерностей их изменения в зависимости от гормонального состава питательной среды.
Выбраны условия селективного разделения различных по природе флавоноидов методом ОФ ВЭЖХ с диодно-матричным и масс-спектрометрическим детектированием с электроспрей ионизацией при положительной и отрицательной полярности. Определение аминокислот методом ВЭЖХ проводили с использованием предварительной дериватизации дансилхлоридом, что позволяет увеличить параметры удерживания аналитов в ОФ ВЭЖХ и обеспечить возможность их детектирования по поглощению в УФ области. Условия извлечения данных аналитов из растительных объектов в литературных источниках весьма противоречивы, поэтому предварительно был построения дизайн экспериментов с целью выбора и оптимизации условий извлечения определяемых биологически активных веществ. Показано, что наиболее значимые факторы, влияющие на извлечение фенольных соединений, - содержание метанола и совместное действие температуры и времени нагревания экстракта; для аминокислот – температура экстракции и концентрация метанола в экстрагенте.
В выбранных условиях исследованы характеристические профили флавоноидов и аминокислот аэропонного и биотехнологического сырья Iris sibirica, выращенного на питательных средах с различным содержанием фитогормонов роста: 6-бензиламинопурина, α-нафтилуксусной кислоты, полученного в ИХиХФТ АлтГУ Выявлены основные метаболиты для контроля биотехнологического сырья. Идентификацию полифенольных соединений проводили методом хромато-масс-спектрометрии.