Целью исследования было сравнение степени развития аутофагии в клетках карциномы шейки матки человека HeLa-V и HeLa-R и в неопухолевых клетках эмбриональных почек человека HEK 293 в условиях голодания двух типов – 24- и48-часового культивирования в среде DMЕM без сыворотки и 4-часовой инкуба-ции в минимальной среде Эрла. В работе оценивали жизнеспособность клеток методом МТТ и экспрессию генов апоптоза (BCL2, BAX, CASP3) и аутофагии(ULK1, BECN1, ATG5, ATG14, MAP1LC3B) методом ПЦР в реальном времени.Культивирование в условиях сывороточного голодания и в среде Эрла привело кзначительному снижению жизнеспособности клеток HEK 293, но не оказаловлияния на клетки HeLa-V и HeLa-R. В опухолевых клетках обеих линий увели-чивалась экспрессия гена антиапоптотического белка BCL2, в то время как вклетках HEK 293 снижалось соотношение генов BCL2/BAX и активировался генCASP3. В клетках HeLa-V и HeLa-R в условиях недостатка питательных веществ наблюдались различные комбинации стимуляции генов начальных этапов ауто-фагии ULK1, BECN1, ATG5 и ATG14, но ни один из вариантов обработки не влиялна экспрессию гена MAP1LC3B. В клетках HEK 293 сывороточное голодание привело к увеличению уровня экспрессии генов BECN1, ATG5, ATG14 иMAP1LC3B. Таким образом, стимуляция аутофагии в клетках HeLa, особенноHeLa-R, препятствует развитию процессов апоптоза, в то время как в клеткахHEK 293 процессы апоптоза и аутофагии происходят параллельно. Культивиро-вание в среде DMEM без сыворотки в течение 48 ч является наиболее эффектив-ным способом индукции аутофагии в клетках опухолевых линий и соответствен-но наиболее подходящей моделью для изучения роли аутофагии в развитии их резистентности к апоптотическому пути гибели.
Original languageRussian
Pages (from-to) 1856–1869
JournalРОССИЙСКИЙ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ ИМ. И.М. СЕЧЕНОВА
Volume109
Issue number12
DOIs
StatePublished - 12 Dec 2023

ID: 116155356