Являясь основным клеточным компонентом высокодинамичной ткани, стромальные клетки эндометрия (ЭнСК) подвергаются циклам пролиферации при гормональной стимуляции, что может представлять риск накопления мутаций и малигнизации. Несмотря на это, стромальные опухоли эндометрия встречаются редко. Настоящее исследование выявило защитные механизмы, которые могут лежать в основе устойчивости ЭнСК к онкогенной трансформации. Все эксперименты были проведены in vitro с использованием следующих методов: FACS, WB, ОТ-ПЦР, IF, молекулярное клонирование, лентивирусная трансдукция и редактирование генома CRISPR/Cas9. Мы выявили, что экспрессия мутантного HRASG12V приводит к старению ЭнСК. Мы экспериментально подтвердили неспособность HRASG12V-экспрессирующих ЭнСК обходить программу старения и возобновлять пролиферацию даже при стимуляции эстрогеном. На молекулярном уровне индукция онкоген-индуцированного старения (ОИС) сопровождалась активацией путей MEK/ERK, PI3K/AKT, p53/p21WAF/CIP/Rb и p38/p16INK4a/Rb; однако ингибирование любого из путей не предотвращало остановку клеточного цикла. Потеря PTEN была установлена как дополнительный признак HRASG12V- индуцированного старения в ЭнСК. Используя CRISPR-Cas9-опосредованный нокаут PTEN, мы идентифицировали индуцированное потерей PTEN старение как резервный молекулярный механизм для предотвращения трансформации ЭнСК, экспрессирующих HRASG12V. Настоящее исследование выдвигает на первый план индуцированное онкогенами старение как противоопухолевый защитный механизм ЭнСК, контролируемый множеством резервных молекулярных путей.
