Исследование генетической предрасположенности к широко распространенным многофакторным заболеваниям является чрезвычайно актуальной задачей медицинской генетики человека, решение которой направлено на познание структурно-функциональной организации генома, ее связи с патогенезом соответствующих заболеваний, что, в целом, является основой для разработки эффективных методов их ДНК-диагностики, способов прогнозирования, профилактики и лечения. Наследственную предрасположенность к многофакторным заболеваниям обусловливает целый комплекс генетических факторов, которыми могут являться как более функционально значимые изменения структуры генов – мутации, так и полиморфные варианты генов, встречающиеся с более высокой частотой в популяциях. За отчетный период проведены исследования молекулярно-генетических причин развития следующих многофакторных заболеваний: рака молочной железы, рака почки, мелкоклеточного рака легкого, бронхиальной астмы. В результате этих исследований получены результаты, представленные ниже.С целью поиска генетических маркеров риска развития рака молочной железы у 68521 женщин с РМЖ и 54865 индивидов контрольной группы с использованием технологии OncoArray – чипа, включающего ~ 500000 SNPs, было проведено генотипирование по четырем миссенс - мутациям в гене HOXB13: p.G84E, p.P190L, p.R217C и p.R268Q. В результате данного исследования все мутации были выявлены у женщин европейского происхождения, но не у азиатов. Мутации p.P190L и p.R217C выявлены также у женщин африканского происхождения. Варианты p.P190L и p.R268Q являются слишком редкими, поэтому невозможно получить достоверные оценки риска развития рака груди. Анализ частоты мутаций p.G84E и p.R217C в гене HOXB13 показал, что они не ассоциированы с риском развития рака молочной железы. Также не выявлено ассоциации с разными подтипами РМЖ.С использованием современной технологии массового параллельного секвенирования у женщин с РМЖ / РЯ был проведен поиск патогенных вариантов генов, ответственных за развитие этих заболеваний. Инсерция c.180dupT в гене PLEKHG7 (Plecstrin homology domain-containing protein, family G, member 7) в гетерозиготном состоянии определена у 35 летней пациентки с протоковой карциномой молочной железы (семейная форма). Скрининг варианта PLEKHG7*c.180dupT у 800 пациенток с РМЖ не выявил дополнительных носителей этого мутантного варианта.Для поиска маркеров эффективности терапии больных раком почки ингибиторами контрольных точек иммунитета (ИКТИ) сформирована коллекция образцов венозной крови и выделена ДНК 40 пациентов с метастатическим раком почки, получающих терапию ИКТИ, а также 100 индивидов контрольной группы, первостепенные родственники которых не имели онкологических заболеваний. Предполагается проведение дальнейших исследований с использованием данной коллеции биологического материала.С целью изучения генетических основ мелкоклеточного рака легкого у 70 больных МРЛ методом MLPA проведен поиск делеций и дупликаций в хромосомной области 17p13, содержащей ген TP53. Установлено, что более трети из исследованных образцов опухолевой ткани больных мелкоклеточным раком легкого имели структурные изменения в кодирующих областях гена TP53. Наиболее частыми событиями являлись дупликации 1-го экзона, выявленные у 23% больных, и делеции с 4-го по 6-й и 11-го экзонов гена TP53, выявленные у 17% пациентов.При изучении фармакогенетических аспектов аллергических заболеваний, в рамках данной работы проведено исследование полиморфных вариантов генов, участвующих в метаболизме гистамина (HRH1, HRH2, HRH3, HRH4) и b2-агонистов (ARG1, ARG2), у больных бронхиальной астмой и в контрольной группе индивидов, проживающих в Республике Башкортостан. Результаты проведенного исследования раскрывают определенные аспекты молекулярного патогенеза БА и свидетельствуют о вовлеченности полиморфных вариантов генов ARG1, ARG2, HRH1, HRH3, HRH4 в развитии бронхиальной астмы. Установлена модель ген-генных взаимодействий (HRH1-HRH3-HRH4), ассоциированная с развитием данного заболевания.С целью изучения генетических и эпигенетических механизмов развития онкологических и аллергических заболеваний был проведен анализ литературных данных и выбраны полиморфные варианты в генах предшественников микроРНК, генах биосинтеза и процессинга микроРНК и сайтах связывания микроРНК с мишенью с использованием баз данных Национального центра биотехнологических информаций (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/), Ensembl Genome Browser (www.ensembl.org), полиморфизма сайта связывания микроРНК (http://compbio.uthsc.edu/miRSNP/miRSNP_detail_all.php) и сформирована панель для проведения генотипирования с использованием технологии микрочипов QuantStudio™12K Flex Real-Time PCR System . Предполагается использование данной панели в последующих этапах исследования в рамках настоящего проекта. Наследственные моногенные (олигогенные) заболевания, в частности, наследственные спастические параплегии, являются тяжелыми инвалидизирующими заболеваниями, для которых в настоящее время не существует эффективного лечения. Для многих подобных заболеваний, в том числе, для НСП, характерны клиническая и генетическая гетерогенность, существуют популяционные различия по частоте встречаемости и спектру мутаций генов, детерминирующих их развитие. Кроме того, в большинстве популяций существует еще значительная доля пациентов, для которых установить генетическую причину заболевания пока не удается, и в настоящее время для решения этой проблемы используются методы NGS секвенирования. Идентификация причинных мутаций, обусловливающих развитие заболевания, является основой для познания его патогенеза и разработки патогенетических методов лечения. На основе сведений об этноспецифических особенностях распространения генетических форм олигогенных заболеваний, спектра и частоты мутаций в ответственных генах, разрабатываются оптимальные для конкретных регионов алгоритмы их ДНК- диагностики, значительно повышающие эффективность медико-генетического консультирования в семьях больных, направленного на профилактику данных таких заболеваний, что имеет большое медицинское и социально-экономическое значение. За отчетный период проведен анализ секвенирования экзома у пациента с аутосомно-доминантной спастической параплегией с неустановленной генетической причиной заболевания. Идентифицирован патогенный вариант с.1246С>T (p.Arg416Cys) в гене атластина (ATL1), подтвержденный секвенированием по Сэнгеру. Установлена частота его распространения среди 63-х неродственных пациентов с НСП, жителей Республики Башкортостан, составившая 4,7%.Проводимые научные исследования молекулярных основ патогенеза частых, тяжелых многофакторных и моногенных (олигогенных) заболеваний направлены на разработку и совершенствование способов их ранней диагностики и новейших терапевтических подходов, в целом, способствующих снижению заболеваемости данными патологиями и связанной с ними смертности.
Объект исследования: ДНК пациентов, жителей Республики Башкортостан с
бронхиальной астмой, раком яичника, раком почки, мелкоклеточным раком легкого,
наследственной моторно-сенсорной нейропатией;
Цель – раскрытие молекулярных механизмов патогенеза многофакторных
онкологических и аллергических заболеваний, а также моногенных нейродегенеративных
патологий, направленное на разработку новых эффективных подходов ДНК-диагностики
и патогенетического лечения.
Методы: секвенирование экзомов, секвенирование по Сэнгеру – при изучении
моногенных заболеваний; ПЦР, ПДРФ-анализ, ПЦР в реальном времени, полногеномный
анализ ассоциаций, анализ метилирования - при изучении многофакторной патологии.
В рамках реализации проекта проведены следующие работы: 1) анализ
литературных данных и формирование панели из полиморфных вариантов,
ассоциированных с онкологическими и аллергическими заболеваниями по данным
кандидатных и полногеномных исследований, а также участвующих в метаболизме
применяемых для лечения данных патологий лекарственных препаратов; 2) анализ
ассоциаций прогенотипированных полиморфных локусов генов с развитием и течением
аллергических и онкологических заболеваний (рака молочной железы и яичников,
метастатического рака почки), с учетом этнической принадлежности индивидов, степени
тяжести заболеваний; 3) анализ уровня метилирования промоторной области
гомеобокссодержащего гена SHOX2 у больных мелкоклеточным раком легкого; 4)
идентифицикация генетических и эпигенетических маркеров риска развития и
эффективности терапии исследуемых онкологических и аллергических заболеваний; 5)
полное секвенирование экзома у пациентов с наследственной моторно-сенсорной
нейропатией с неустановленной генетической причиной заболевания;
биоинформатический анализ результатов исследования и их валидация методом
секвенирования по Сэнгеру.
Исследование генетической предрасположенности к широко распространенным
многофакторным заболеваниям является чрезвычайно актуальной задачей медицинской
генетики человека, решение которой направлено на познание структурно-функциональной
организации генома, ее связи с патогенезом соответствующих заболеваний, что, в целом,
является основой для разработки эффективных методов их ДНК-диагностики, способов
прогнозирования, профилактики и лечения. Наследственную предрасположенность к
многофакторным заболеваниям обусловливает целый комплекс генетических факторов,
которыми могут являться как более функционально значимые изменения структуры генов
– мутации, так и полиморфные варианты генов, встречающиеся с более высокой частотой
в популяциях. Немаловажную роль в реализации генетической информации играют и
эпигенетические факторы, в том числе микроРНК, регулирующие экспрессию генов.
Отдельным актуальным направлением исследований является поиск генетических и
46
эпигенетических маркеров эффективности терапии различных заболеваний, что
необходимо для разработки персонализированных подходов лечения больных.
За отчетный период проведены исследования молекулярно-генетических причин
развития следующих многофакторных заболеваний: рака молочной железы и яичника,
рака почки, мелкоклеточного рака легкого, бронхиальной астмы. В результате этих
исследований получены результаты, представленные ниже.
Проведен анализ ассоциации полиморфных локусов генов биогенеза и
предшественников микроРНК с риском развития высоко-злокачественного серозного РЯ
(РЯ). Исследование проведено в группах сравнения случай / контроль с оценкой
ассоциации заболеваний с отдельными полиморфными вариантами генов. Изучены 29
полиморфных локусов, расположенных в генах биогенеза микроРНК DROSHA /
RNASEN, DGCR8, DICER1, XPO5, RAN, PIWIL1 / HIWI, AGO1 / EIF2C1, AGO2,
GEMIN4, GEMIN3 / DDX20, DDX5 и микроРНК miR196a-2, miR27a , у больных с РЯ и в
контрольной группе индивидов русской, татарской и башкирской этической
принадлежности. Результаты мета-анализа, объединившего данные для трех этнических
групп (русских, татар и башкир) показали, что аллели полиморфных локусов rs2740351 и
rs7813 в гене GEMIN4 ассоциированы с риском развития высокозлокачественного
серозного РЯ. При сравнении разных вариаций генотипов были определены наиболее
информативные модели ассоциации с риском развития РЯ. Для полиморфного локуса
rs2740351 наиболее предпочтительной является доминантная модель, согласно которой у
носителей генотипов с минорным аллелем (AA vs AG - GG) увеличивается риск развития
РМЖ: OR = 1.42, p = 0.021. В соответствии с аддитивной моделью, показатель отношения
шансов соответствовал значению 1.29 при р = 0.0086. Для полиморфного локуса rs7813
наиболее оптимальными являются аддитивная и рецессивная модели наследования.
Согласно рецессивной модели, у женщин с генотипом GG повышается вероятность
развития РМЖ по сравнению с генотипами AA - AG, OR = 1.46, p = 0.031.
В ходе выполнения проекта была сформирована уникальная выборка образцов
ДНК, выделенная из венозной крови пациентов со светлоклеточной почечно-клеточной
карциномой (скПКК), получающих терапию ингибиторами контрольных точек иммунного
ответа (ИКТИ). В результате анализа ассоциаций 23 полиморфных локусов в генах
предшественников микроРНК, генах биосинтеза и процессинга микроРНК и сайтах
связывания микроРНК с мишенью, а также генах контрольных точек иммунитета был
обнаружен ряд генотипов и аллелей, ассоциированных с риском развития тяжелых форм
нежелательных явлений (НЯ) при ответе на терапию ИКТИ. Показано, что с повышением
риска развития тяжелых форм НЯ ассоциировано носительство генотипа rs2910164*СС
47
гена предшественника микроРНК-146а, аллеля rs7866740*С гена PD-L1, аллеля
rs4903064*С и генотипа rs4903064*СС гена DPF3. Также обнаружено, что генотип
rs231775*GG гена CTLA4 ассоциирован со снижением риска развития тяжелых форм НЯ у
пациентов со скПКК, получающих терапию ИКТИ. Таким образом, результаты проекта, с
учетом дополнительных уточняющих исследований, могут быть использованы при
создании прогностических систем молекулярных маркеров, а также вносят вклад в
понимание патогенеза почечно-клеточных карцином и формирование резистентности при
применении ингибиторов контрольных точек иммунитета при данном типе
злокачественных опухолей.
У 50 больных мелкоклеточным раком легкого проведен анализ уровня
метилирования промоторной области гомеобокссодержащего гена SHOX2.
Гиперметилирование промоторной области гена SHOX2 обнаружено у 46% образцов.
Полученные результаты, а также литературные данные позволяют судить о
гиперметилировании гена SHOX2 как о потенциальном маркере для ранней диагностики
рака легкого и мониторинга его течения.
В результате исследования 15 полиморфных локусов, ассоциированным ранее с
развитием БА при GWAS, выполненного на независимой выборке индивидов с
сочетанными формами аллергопатологий, выявлены ассоциации генотипа rs3769309*GG и
аллеля rs3769309*G гена RAPGEF4 с развитием БА с сопутствующим АР у русских,
генотипа rs6004423*GG и аллеля rs6004423*G гена KIAA1671- с развитием БА с
сопутствующим АР у русских и башкир, аллеля rs8054797*А, расположенного вблизи гена
BRD7, - с развитием БА с сопутствующим АР у башкир. Обнаружены ассоциации аллеля
rs13207327*T гена DACT2, генотипа rs1511599*AA и аллеля rs1511599*A полиморфного
варианта, локализованного в области 3q26.2, с сочетанными АЗ (БА, АР, АД). Метаанализ результатов исследований данных полиморфных вариантов в группах больных
русской, татарской, башкирской и смешанной этнической принадлежности, показал
ассоциацию аллеля rs3769309*G гена RAPGEF4 с развитием БА с сопутствующим АР, что
подтверждает роль данного варианта в качестве общего маркера риска развития данных
заболеваний. В целом, полученные результаты исследования свидетельствуют о роли
целого ряда полиморфных вариантов, выявленных при проведенном ранее
полногеномном анализе ассоциации БА, в развитии сочетанной аллергопатологии (БА, АР
и АД) у индивидов русской, татарской и башкирской этнической принадлежности.
Наследственные моногенные (олигогенные) заболевания, в частности,
наследственные моторно-сенсорные нейропатии, являются тяжелыми
инвалидизирующими заболеваниями, для которых в настоящее время не существует
48
эффективного лечения. Для многих подобных заболеваний, в том числе, для НМСН,
характерны клиническая и генетическая гетерогенность, существуют популяционные
различия по частоте встречаемости и спектру мутаций генов, детерминирующих их
развитие. Кроме того, в большинстве популяций существует еще значительная доля
пациентов, для которых установить генетическую причину заболевания пока не удается, и
в настоящее время для решения этой проблемы используются методы NGS
секвенирования. Идентификация причинных мутаций, обусловливающих развитие
заболевания, является основой для познания его патогенеза и разработки
патогенетических методов лечения. На основе сведений об этноспецифических
особенностях распространения генетических форм олигогенных заболеваний, спектра и
частоты мутаций в ответственных генах, разрабатываются оптимальные для конкретных
регионов алгоритмы их ДНК- диагностики, значительно повышающие эффективность
медико-генетического консультирования в семьях больных, направленного на
профилактику данных таких заболеваний, что имеет большое медицинское и социальноэкономическое значение.
За отчетный период проведено полное секвенирование экзома у двух
неродственных пациентов с аутосомно-доминантной аксональной формой НМСН. В
результате исследования и последующего биоинформатического анализа у обследованных
пациентов в гетерозиготном состоянии была идентифицирована одинаковая миссенсмутация –c.254C>G (p.Ser85Сys) в гене MATR3. Наличие данной мутации у
обследованных пациентов было подтверждено секвенированием по Сэнгеру. Ранее данная
мутация была описана как генетическая причина бокового амиотрофического склероза и
дистальной миопатии, но не НМСН, что вызвало интерес в интерпретации полученных
нами данных. Анализируя литературные данные, описывающие клинические особенности
пациентов с мутацией p.Ser85Cys, можно заключить, что этот миссенс-вариант в гене
матрина-3 способен вызывать как миогенное, так и нейрогенное заболевание, фенотип
которого, вероятно, зависит и от других, модифицирующих, генетических и
эпигенетических факторов.
Исследование генетической предрасположенности к широко распространенным
многофакторным заболеваниям является чрезвычайно актуальной задачей медицинской
генетики человека, решение которой направлено на познание структурно-функциональной
организации генома, ее связи с патогенезом соответствующих заболеваний, что, в целом,
является основой для разработки эффективных методов их ДНК-диагностики, способов
прогнозирования, профилактики и лечения. Наследственную предрасположенность к
многофакторным заболеваниям обусловливает целый комплекс генетических факторов,
которыми могут являться как более функционально значимые изменения структуры генов
– мутации, так и полиморфные варианты генов, встречающиеся с более высокой частотой
в популяциях. Немаловажную роль в реализации генетической информации играют и
эпигенетические факторы, в том числе микроРНК, регулирующие экспрессию генов.
Отдельным актуальным направлением исследований является поиск генетических и
46
эпигенетических маркеров эффективности терапии различных заболеваний, что
необходимо для разработки персонализированных подходов лечения больных.
За отчетный период проведены исследования молекулярно-генетических причин
развития следующих многофакторных заболеваний: рака молочной железы и яичника,
рака почки, мелкоклеточного рака легкого, бронхиальной астмы. В результате этих
исследований получены результаты, представленные ниже.
Проведен анализ ассоциации полиморфных локусов генов биогенеза и
предшественников микроРНК с риском развития высоко-злокачественного серозного РЯ
(РЯ). Исследование проведено в группах сравнения случай / контроль с оценкой
ассоциации заболеваний с отдельными полиморфными вариантами генов. Изучены 29
полиморфных локусов, расположенных в генах биогенеза микроРНК DROSHA /
RNASEN, DGCR8, DICER1, XPO5, RAN, PIWIL1 / HIWI, AGO1 / EIF2C1, AGO2,
GEMIN4, GEMIN3 / DDX20, DDX5 и микроРНК miR196a-2, miR27a , у больных с РЯ и в
контрольной группе индивидов русской, татарской и башкирской этической
принадлежности. Результаты мета-анализа, объединившего данные для трех этнических
групп (русских, татар и башкир) показали, что аллели полиморфных локусов rs2740351 и
rs7813 в гене GEMIN4 ассоциированы с риском развития высокозлокачественного
серозного РЯ. При сравнении разных вариаций генотипов были определены наиболее
информативные модели ассоциации с риском развития РЯ. Для полиморфного локуса
rs2740351 наиболее предпочтительной является доминантная модель, согласно которой у
носителей генотипов с минорным аллелем (AA vs AG - GG) увеличивается риск развития
РМЖ: OR = 1.42, p = 0.021. В соответствии с аддитивной моделью, показатель отношения
шансов соответствовал значению 1.29 при р = 0.0086. Для полиморфного локуса rs7813
наиболее оптимальными являются аддитивная и рецессивная модели наследования.
Согласно рецессивной модели, у женщин с генотипом GG повышается вероятность
развития РМЖ по сравнению с генотипами AA - AG, OR = 1.46, p = 0.031.
В ходе выполнения проекта была сформирована уникальная выборка образцов
ДНК, выделенная из венозной крови пациентов со светлоклеточной почечно-клеточной
карциномой (скПКК), получающих терапию ингибиторами контрольных точек иммунного
ответа (ИКТИ). В результате анализа ассоциаций 23 полиморфных локусов в генах
предшественников микроРНК, генах биосинтеза и процессинга микроРНК и сайтах
связывания микроРНК с мишенью, а также генах контрольных точек иммунитета был
обнаружен ряд генотипов и аллелей, ассоциированных с риском развития тяжелых форм
нежелательных явлений (НЯ) при ответе на терапию ИКТИ. Показано, что с повышением
риска развития тяжелых форм НЯ ассоциировано носительство генотипа rs2910164*СС
47
гена предшественника микроРНК-146а, аллеля rs7866740*С гена PD-L1, аллеля
rs4903064*С и генотипа rs4903064*СС гена DPF3. Также обнаружено, что генотип
rs231775*GG гена CTLA4 ассоциирован со снижением риска развития тяжелых форм НЯ у
пациентов со скПКК, получающих терапию ИКТИ. Таким образом, результаты проекта, с
учетом дополнительных уточняющих исследований, могут быть использованы при
создании прогностических систем молекулярных маркеров, а также вносят вклад в
понимание патогенеза почечно-клеточных карцином и формирование резистентности при
применении ингибиторов контрольных точек иммунитета при данном типе
злокачественных опухолей.
У 50 больных мелкоклеточным раком легкого проведен анализ уровня
метилирования промоторной области гомеобокссодержащего гена SHOX2.
Гиперметилирование промоторной области гена SHOX2 обнаружено у 46% образцов.
Полученные результаты, а также литературные данные позволяют судить о
гиперметилировании гена SHOX2 как о потенциальном маркере для ранней диагностики
рака легкого и мониторинга его течения.
В результате исследования 15 полиморфных локусов, ассоциированным ранее с
развитием БА при GWAS, выполненного на независимой выборке индивидов с
сочетанными формами аллергопатологий, выявлены ассоциации генотипа rs3769309*GG и
аллеля rs3769309*G гена RAPGEF4 с развитием БА с сопутствующим АР у русских,
генотипа rs6004423*GG и аллеля rs6004423*G гена KIAA1671- с развитием БА с
сопутствующим АР у русских и башкир, аллеля rs8054797*А, расположенного вблизи гена
BRD7, - с развитием БА с сопутствующим АР у башкир. Обнаружены ассоциации аллеля
rs13207327*T гена DACT2, генотипа rs1511599*AA и аллеля rs1511599*A полиморфного
варианта, локализованного в области 3q26.2, с сочетанными АЗ (БА, АР, АД). Метаанализ результатов исследований данных полиморфных вариантов в группах больных
русской, татарской, башкирской и смешанной этнической принадлежности, показал
ассоциацию аллеля rs3769309*G гена RAPGEF4 с развитием БА с сопутствующим АР, что
подтверждает роль данного варианта в качестве общего маркера риска развития данных
заболеваний. В целом, полученные результаты исследования свидетельствуют о роли
целого ряда полиморфных вариантов, выявленных при проведенном ранее
полногеномном анализе ассоциации БА, в развитии сочетанной аллергопатологии (БА, АР
и АД) у индивидов русской, татарской и башкирской этнической принадлежности.
Наследственные моногенные (олигогенные) заболевания, в частности,
наследственные моторно-сенсорные нейропатии, являются тяжелыми
инвалидизирующими заболеваниями, для которых в настоящее время не существует
48
эффективного лечения. Для многих подобных заболеваний, в том числе, для НМСН,
характерны клиническая и генетическая гетерогенность, существуют популяционные
различия по частоте встречаемости и спектру мутаций генов, детерминирующих их
развитие. Кроме того, в большинстве популяций существует еще значительная доля
пациентов, для которых установить генетическую причину заболевания пока не удается, и
в настоящее время для решения этой проблемы используются методы NGS
секвенирования. Идентификация причинных мутаций, обусловливающих развитие
заболевания, является основой для познания его патогенеза и разработки
патогенетических методов лечения. На основе сведений об этноспецифических
особенностях распространения генетических форм олигогенных заболеваний, спектра и
частоты мутаций в ответственных генах, разрабатываются оптимальные для конкретных
регионов алгоритмы их ДНК- диагностики, значительно повышающие эффективность
медико-генетического консультирования в семьях больных, направленного на
профилактику данных таких заболеваний, что имеет большое медицинское и социальноэкономическое значение.
За отчетный период проведено полное секвенирование экзома у двух
неродственных пациентов с аутосомно-доминантной аксональной формой НМСН. В
результате исследования и последующего биоинформатического анализа у обследованных
пациентов в гетерозиготном состоянии была идентифицирована одинаковая миссенсмутация –c.254C>G (p.Ser85Сys) в гене MATR3. Наличие данной мутации у
обследованных пациентов было подтверждено секвенированием по Сэнгеру. Ранее данная
мутация была описана как генетическая причина бокового амиотрофического склероза и
дистальной миопатии, но не НМСН, что вызвало интерес в интерпретации полученных
нами данных. Анализируя литературные данные, описывающие клинические особенности
пациентов с мутацией p.Ser85Cys, можно заключить, что этот миссенс-вариант в гене
матрина-3 способен вызывать как миогенное, так и нейрогенное заболевание, фенотип
которого, вероятно, зависит и от других, модифицирующих, генетических и
эпигенетических факторов.
| Краткое название | GZ-2022 |
|---|
| Акроним | М1_2020 - 3 |
|---|
| Статус | Завершено |
|---|
| Эффективные даты начала/конца | 1/01/22 → 31/12/22 |
|---|
