Селективная система на основе фрагментов вируса М1 для отбора трансформантов дрожжей Saccharomyces cerevisiae. / Музаев, Дмитрий Михайлович; Румянцев, Андрей Михайлович; Самбук, Елена Викторовна.
In: ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ГЕНЕТИКА, Vol. 18, No. 2, 2020, p. 251-263.Research output: Contribution to journal › Article
}
TY - JOUR
T1 - Селективная система на основе фрагментов вируса М1 для отбора трансформантов дрожжей Saccharomyces cerevisiae.
AU - Музаев, Дмитрий Михайлович
AU - Румянцев, Андрей Михайлович
AU - Самбук, Елена Викторовна
PY - 2020
Y1 - 2020
N2 - Цель. Задачей настоящей работы было получение селективной системы на основе вируса М1 дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Методы. Для создания штамма-реципиента фрагмент ДНК, кодирующий киллер-токсин вируса М1 под контролем регулируемого промотора гена GAL1, был встроен в геном штаммов Y-1236 и Y-2177 S. cerevisiae, чувствительных к токсинам. Результаты. Интеграция такой экспрессионной кассеты приводит к появлению условной летальности, а именно, данные штаммы гибнут на среде с галактозой, когда происходит синтез киллер-токсина. Для трансформации полученных штаммов используется линейный фрагмент ДНК, содержащий ген интереса, фланкированный последовательностями, гомологичными промотору гена GAL1 и терминаторной области гена CYC1. При трансформации за счет гомологичной рекомбинации происходит выщепление последовательности, кодирующей киллер-токсин, и трансформанты растут на среде с галактозой. Выводы. Предложенная селективная система сочетает в себе основные преимущества других систем: возможность применения прост
AB - Цель. Задачей настоящей работы было получение селективной системы на основе вируса М1 дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Методы. Для создания штамма-реципиента фрагмент ДНК, кодирующий киллер-токсин вируса М1 под контролем регулируемого промотора гена GAL1, был встроен в геном штаммов Y-1236 и Y-2177 S. cerevisiae, чувствительных к токсинам. Результаты. Интеграция такой экспрессионной кассеты приводит к появлению условной летальности, а именно, данные штаммы гибнут на среде с галактозой, когда происходит синтез киллер-токсина. Для трансформации полученных штаммов используется линейный фрагмент ДНК, содержащий ген интереса, фланкированный последовательностями, гомологичными промотору гена GAL1 и терминаторной области гена CYC1. При трансформации за счет гомологичной рекомбинации происходит выщепление последовательности, кодирующей киллер-токсин, и трансформанты растут на среде с галактозой. Выводы. Предложенная селективная система сочетает в себе основные преимущества других систем: возможность применения прост
KW - killer-toxins
KW - M1 and M28 viruses
KW - selective markers
KW - yeast Saccharomyces cerevisiae
KW - вирусы М1 и М28
KW - дрожжи Saccharomyces cerevisiae
KW - киллер-токсины
KW - селективные маркеры
KW - killer-toxins
KW - M1 and M28 viruses
KW - selective markers
KW - yeast Saccharomyces cerevisiae
KW - вирусы М1 и М28
KW - дрожжи Saccharomyces cerevisiae
KW - киллер-токсины
KW - селективные маркеры
M3 - статья
VL - 18
SP - 251
EP - 263
JO - ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ГЕНЕТИКА
JF - ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ГЕНЕТИКА
SN - 1811-0932
IS - 2
ER -
ID: 78600530